期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办、天津医院承办。本刊创刊至今已有30年，始终是我国骨科领域最权威的学术期刊。30年来，我们始终以学术质量为根本，以促进骨科事业发展为己任，以造福人民为最终目标。目前，我刊已被国内外多家数据库收录，影响因子、被引频次、学术地位等持续领先。作为骨科学术交流平台，我们欢迎各种类型的稿件，请关注我们、信赖我们、支持我们、与我们一同进步。
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首页>中华骨科杂志
- 杂志名称：中华骨科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-2352
- 国内刊号：12-1113/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
Tet-on基因表达系统转染骨髓基质干细胞和诱导调控效应检测
盛璞义；廖威明；李晓艳；李佛保；何智勇；黄纲；谭美珍
关键词：基因表达, 骨髓, 干细胞
摘要：目的探讨利用Tet-on基因表达系统调控目的基因在骨髓基质干细胞中表达的可能性和量效关系,为利用该系统调控BMP基因在骨髓基质干细胞中的表达奠定基础.方法以荧光素酶(lucifrase)基因为目的基因,应用Lipofectamine介导的瞬间转染方法,将pTet-on调节质粒和pTRE-lucifrase反应质粒共转染骨髓基质干细胞,加入系列浓度的强力霉素(doxycyline)后,观察doxy-cyline的诱导效应.结果(1)pTet-on表达系统质粒DNA经HindⅢ单酶切、琼脂糖凝胶电泳后,可见6.02kb和1.38kb两个片段;pTRE-luciferase质粒经HindⅢ单酶切线性化,可见5.2kb的片段,均符合质粒图谱.(2)随着doxyc订ine浓度的增加,荧光素酶的活性也逐渐增加.未转染的骨髓基质干细胞虽经doxycyline诱导,但其RLU值与空白对照(蒸馏水)非常接近,说明未转染的骨髓基质于细胞不受doxy-cyline诱导.而转染的骨髓基质干细胞在未加入诱导剂时,其RLU(relative-luciferase-unit)值也接近空白对照值.结论转染Tet-on基因表达控制系统的骨髓基质干细胞对doxycyline诱导具有较好的反应性,目的基因荧光素酶基因的表达效力对doxycyline具有严格的计量依赖关系.因此,利用Tet-on基因调控系统对目标基因在骨髓基质干细胞中的表达进行调控是可行的.
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