期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办、天津医院承办。本刊创刊至今已有30年，始终是我国骨科领域最权威的学术期刊。30年来，我们始终以学术质量为根本，以促进骨科事业发展为己任，以造福人民为最终目标。目前，我刊已被国内外多家数据库收录，影响因子、被引频次、学术地位等持续领先。作为骨科学术交流平台，我们欢迎各种类型的稿件，请关注我们、信赖我们、支持我们、与我们一同进步。
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首页>中华骨科杂志
- 杂志名称：中华骨科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-2352
- 国内刊号：12-1113/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
增强绿色荧光蛋白标记比较腺病毒、腺相关病毒体外转染兔软骨细胞的效果
翁习生；李连华；邱贵兴；杨新宇；吴小兵
关键词：软骨细胞, 腺病毒科, 转染
摘要：目的 通过增强绿色荧光蛋白(eGFP)标记,比较腺病毒(Ad)、腺相关病毒(AAV)对体外培养软骨细胞的转染效果.方法 体外培养正常3月龄新西兰兔关节软骨细胞,以rAd5-eGFP、rAAV2-eGFP分别转染原代关节软骨细胞,计算佳传染复数.之后以佳传染复数的病毒重组体转染软骨细胞,分别应用流式细胞仪检测绘制转染率的时间一反应曲线,倒置荧光显微镜下观察转染后细胞的大体形态、绿色荧光的表达情况并应用荧光定量PCR检测转染前后软骨细胞Ⅱ型胶原mRNA表达水平的变化.结果 rAd5-eGFP、rAAV2-eGFP的佳传染复数分别为1×103 vp/cell和1×105 vg/cell.分别应用佳传染复数体外转染原代培养的软骨细胞后,rAd5-eGFP在转染后1～2 d荧光表达即可达到高峰,但之后迅速衰减,在转染后第28天基本检测不到荧光表达.rAAV2-eGFP在转染第7天荧光表达达高峰,随之缓慢衰减,在转染后第56天仍可检测到绿色荧光表达.荧光定量PCR检测显示,rAd5-eGFP在转染软骨细胞后,软骨细胞合成Ⅱ型胶原mRNA的水平明显下降,而rAAV2-eGFP则影响不显著.结论 Ad转染体外培养的关节软骨细胞后,目的基因的表达迅速,但维持时间短,对软骨细胞表型的影响较明显;AAV转染软骨细胞后,目的基因的表达缓慢,但维持时间长,且对软骨细胞表型的影响较小.AAV更适于作为软骨细胞的体外转染载体.
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