期刊简介
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首页>中华骨科杂志
- 杂志名称：中华骨科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-2352
- 国内刊号：12-1113/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
华蟾酥毒基诱导骨肉瘤细胞凋亡的体外实验研究
尹军强；谢显彪；温丽丽；黄纲；王博；王晋；沈靖南
关键词：华蟾蜍毒素, 骨肉瘤, 细胞凋亡
摘要：目的 研究华蟾酥毒基(cinobufagin)对多种骨肉瘤细胞系的增殖抑制和诱导凋亡作用,并探讨其相关机制.方法 不同浓度的华蟾素毒基分别处理骨肉瘤细胞系U2OS、MG63和SaO2后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察不同骨肉瘤细胞系的增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期的变化,细胞核荧光染色及Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,Western blot检测IAPs和Bcl-2家族凋亡相关蛋白凋亡相关蛋白Bax、cleaved-PARP、xIAP、cIAP-1、survivin及p65的表达.结果 MTT检测显示,华蟾酥毒基可明显抑制骨肉瘤细胞U2OS、MG63和SaO2的增殖,其抑制细胞增殖的作用呈剂量和时间依赖性,其对U2OS、MG63和SaO2细胞的48 h IC50值分别为(104.83±16.96) nmol/L、(47.07±7.5) nmol/L和(136.72±10.08)nmol/L.100 nmol/L华蟾酥毒基处理骨肉瘤细胞12 h后,流式细胞仪检测可见骨肉瘤U2OS、MG63和SaO2的GdG1期细胞比例下降,GJM期细胞比例增加,表明华蟾素毒基主要通过将细胞阻滞在GJM期,以抑制骨肉瘤细胞的增殖.进一步Hoechst 33258细胞核染色发现,华蟾素毒基可诱导骨肉瘤细胞产生典型凋亡小体,Annexin V/PI检测100 nmol/L华蟾酥毒基作用48 h后,U2OS、MG63和SaO2细胞凋亡率分别为33.6％±6.4％、36.4％±7.8％及29.3％±5.1％.表明华蟾酥毒基的抗骨肉瘤效果是通过诱导骨肉瘤细胞凋亡来实现.在探讨其诱导骨肉瘤细胞凋亡的相关机制中,通过Western blot检测发现其诱导凋亡的作用机制是通过上调IAPs和Bcl-2家族凋亡相关蛋白Bax、cleaved-PARP,下调xIAP、cIAP-1、survivin及p65蛋白来实现.结论 华蟾酥毒基可明显抑制骨肉瘤细胞株U2OS、MG63和SaO2细胞增殖,阻滞细胞在G2/M期,并诱导其凋亡,其诱导凋亡的作用机制为调节IAPs和Bcl-2凋亡相关家族蛋白的活性.
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