期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办、天津医院承办。本刊创刊至今已有30年，始终是我国骨科领域最权威的学术期刊。30年来，我们始终以学术质量为根本，以促进骨科事业发展为己任，以造福人民为最终目标。目前，我刊已被国内外多家数据库收录，影响因子、被引频次、学术地位等持续领先。作为骨科学术交流平台，我们欢迎各种类型的稿件，请关注我们、信赖我们、支持我们、与我们一同进步。
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首页>中华骨科杂志
- 杂志名称：中华骨科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-2352
- 国内刊号：12-1113/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
慢病毒介导的shRNA干扰PTEN表达促皮层神经元轴突再生及脊髓损伤修复
卢璐；周恒星；褚天慈；李付元；刘俊；史仲举；孔晓红；冯世庆
关键词：脊髓损伤, RNA干扰, 慢病毒属, 轴突, 再生
摘要：目的 观察慢病毒介导特异性短发夹RNA (short hairpin RNA,shRNA)干扰第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)表达对皮层神经元轴突再生及脊髓损伤修复的影响.方法 体内实验和体外实验两部分各分四组:阴性对照组(DMEM)、空载慢病毒组(Lenti-control)、空白载体组(Lenti-scramble)、慢病毒介导shRNA组(Lenti-shRNA).体外神经元转染72 h后,Western blot检测各组PTEN表达情况,免疫荧光检测神经元轴突再生能力;体内载体注射1周后,Western blot检测各组PTEN表达情况;6周后荧光显微镜观察皮质脊髓束穿越脊髓损伤局部周围增强绿色荧光蛋白荧光强度及突触素表达情况.采用大鼠脊髓损伤评分评价大鼠后肢运动恢复情况.结果 慢病毒介导shRNA组体外转染神经元后PTEN表达水平比阴性对照组下降83.75％±2.85％,与其他组比较具有统计学意义(F=4277,P＜ 0.05);轴突长度(249.70±10.70)μm,大于阴性对照组(95.71±20.24) μm、空载慢病毒组(97.00±22.82)μm及空白载体组(87.57±19.34)μm,差异具有统计学意义(F=84.74,P＜ 0.05);每个神经元一级突起数量(5.800±0.359)个,大于阴性对照组(2.800±0.678)个、空载慢病毒组(2.900±0.389)个及空白载体组(3.000±0.877)个,其差异具有统计学意义(F=16.47,P＜ 0.05);神经元突起穿越硫酸软骨素蛋白多糖基质的百分比20.60％± 1.80％,大于阴性对照组6.70％±1.45％、空载慢病毒组5.50％±1.69％、空白载体组5.60％±1.77％,其差异具有统计学意义(F=94.90,P＜0.05).慢病毒介导shRNA注射大脑皮层运动区后,第6周大鼠脊髓损伤评分达(13.29±0.42)分,高于阴性对照组(7.00±1.48)分,空载慢病毒组(6.43±1.43)分,空白载体组(6.29±1.22)分,其差异具有统计学意义(F=44.85,P＜ 0.05).皮层组织PTEN表达水平下降84.57％±1.87％,损伤中心尾端见绿色荧光,突触素染色阳性面积明显增大.结论 慢病毒介导shRNA下调PTEN基因表达后可明显提高脊髓损伤后轴突再生能力,促进神经功能修复.
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