期刊简介

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  • 杂志名称:中华骨科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0253-2352
  • 国内刊号:12-1113/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:期刊收录:哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中华骨科杂志2017年第06期

降钙素基因相关肽对骨质疏松性骨折愈合影响的体外研究

梁伟;吕天成;李理;李兵

关键词:降钙素基因相关肽, 骨质疏松, 骨折
摘要:目的 探讨降钙素相关基因肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对骨质疏松大鼠的骨髓基质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化能力及其血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)增殖的影响,及其促进骨质疏松性骨折愈合的细胞分子学作用机制.方法 取3月龄SD大鼠l0只,予双侧卵巢切除术制作骨质疏松模型,术后6个月予显微CT (Micro-CT)行骨密度检测,确定建模成功;后采用全血贴壁法分离骨质疏松性大鼠的BMSCs及VECs;在细胞培养液中加入不同浓度(1×10-7~1×10-10 mol/L)的CGRP,采用细胞增殖检测(CCK-8)法检测细胞增殖能力;CGRP对骨质疏松大鼠BMSCs成骨分化能力的影响:通过碱性磷酸酶活性检测及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、重组人骨形态发生蛋白2、骨黏连蛋白、RunX2蛋白等成骨相关细胞基因mRNA的表达.CGRP对骨质疏松大鼠VECs血管化的影响:采用ELISA、RT-PCR法分别检测细胞内皮细胞生长因子(vascular cell endothelial growth factor,VEGF)的蛋白分泌和基因表达水平.结果 成功分离培养出骨质疏松大鼠BMSCs;CCK-8法测定细胞增殖能力,CGRP对BMSCs细胞的影响:CGRP各浓度组较对照组均增加,且呈剂量依赖关系,7d时对照组OD值为0.58±0.02,CGRP组中107~10-10 mol/L分别为0.80±0.03,0.79±0.03,0.74±0.03,0.69±0.03,与对照组的差异均有统计学意义;CGRP对VECs细胞的影响:对照组OD值为2.20±0.01,CGRP组中10-7~10-10 mol/L分别为4.12±0.04,3.90±0.02,3.56±0.04,3.12±0.04,与对照组的差异均有统计学意义.碱性磷酸酶活性检测及RT-PCR方法检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原、重组人骨形态发生蛋白2、骨黏连蛋白、RunX2蛋白等成骨相关细胞基因mRNA的表达,对照组与CGRP应用的各浓度组的差异均有统计学意义.结论 10-7~10-10 mol/L的CGRP可以促进骨质疏松大鼠BMSCs及VECs增殖,且呈浓度依赖性,并能促进BM-SCs的成骨分化、细胞VEGF基因表达及蛋白的分泌、血管生成.