期刊简介

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  • 杂志名称:中华骨科杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:0253-2352
  • 国内刊号:12-1113/R
  • 出版周期:半月刊
期刊荣誉:期刊收录:哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
中华骨科杂志2017年第01期

Pannexin1通道蛋白对微张力刺激下骨髓间质干细胞成骨分化的影响

李盛龙;王喆;张晓晶;汤欣

关键词:间质干细胞, 细胞分化, 物理刺激
摘要:目的探讨Pannexin1(Px1)通道蛋白对微张力刺激下骨髓间质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨分化的影响。方法自Sprague Dawley大鼠(3周,雌雄不限,100~120 g)股骨和胫骨中提取全骨髓细胞进行原代培养。使用Px1通道蛋白抑制剂——甘珀酸/生胃酮(carbenoxolone,CBX)的安全剂量100μmol/L(通过CCK8细胞活性检测试剂测得)进行实验。利用全骨髓培养法培养原代大鼠MSCs,细胞传代至3~4代时,获得纯度较好的MSCs。将MSCs随机分为三组:对照组(MSCs既不经CXB处理也不施加微张力刺激)、微张力刺激组(4000μstrain)和微张力刺激+CBX组。微张力刺激时间为15 min,CBX预处理时间分别为3 h、6 h、12 h和24 h。测定碱性磷酸酶活性、Ⅰ型胶原蛋白的表达、细胞内钙离子(Ca2+)的浓度,以及Px1通道蛋白、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p?p38 mitogen?activated protein kinase,p?p38MAPK)和p?ERK的表达活性。结果碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达活性在微张力刺激组高,而使用CBX预处理后表达则不会升高。微张力刺激也可上调Ⅰ型胶原蛋白的表达,增加Ca2+浓度,上调Px1通道蛋白及p?p38MAPK的表达,使用CBX预处理会降低以上效果。但微张力刺激下p?ERK的下调表达不受CBX预处理的影响。结论微张力刺激可促进MSCs成骨分化,但使用CBX预处理会抑制微张力刺激的促进作用;其可能机制是CBX抑制了p?p38MAPK的活性。