期刊简介
中国科学技术协会主管，中华医学会主办、天津医院承办。本刊创刊至今已有30年，始终是我国骨科领域最权威的学术期刊。30年来，我们始终以学术质量为根本，以促进骨科事业发展为己任，以造福人民为最终目标。目前，我刊已被国内外多家数据库收录，影响因子、被引频次、学术地位等持续领先。作为骨科学术交流平台，我们欢迎各种类型的稿件，请关注我们、信赖我们、支持我们、与我们一同进步。
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首页>中华骨科杂志
- 杂志名称：中华骨科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0253-2352
- 国内刊号：12-1113/R
- 出版周期：半月刊
期刊荣誉：期刊收录：哥白尼索引(波兰), 万方收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 剑桥科学文摘, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 维普收录(中), 文摘杂志, 知网收录(中), CA 化学文摘(美), 国家图书馆馆藏, 上海图书馆馆藏, 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版)
还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶-4在成骨细胞凋亡中的作用
张华峰；白树财；徐倩；李晖；李东；李呈凯；宋秀钢；泰亚飞；马信龙
关键词：地塞米松, 细胞凋亡, 活性氧, NADPH氧化酶
摘要：目的 探讨高浓度地塞米松(dexamethasone,DEX)激活还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate-reduced,NADPH)氧化酶-4(NADPH oxidase 4,Nox4)途径产生氧自由基对成骨细胞凋亡的影响和作用机制.方法 设正常对照组,DEX组,DEX+N-乙酰半胱氨酸(n-acetylcysteine,NAC)组,NAC组,DEX+二亚苯基碘(diphenyleneiodonium chloride,DPI)组,DPI组.干预培养24h后,倒置显微镜下观察成骨细胞形态;MTT法检测细胞活性;荧光探针DCFH-DA检测细胞内氧自由基水平;Hoechst染色检测成骨细胞凋亡;荧光定量PCR及Western-Blot检测Nox4/NADPH氧化酶基因和蛋白的表达;Nox4 siRNA沉默细胞内Nox4/NADPH氧化酶表达后,通过荧光探针检测氧自由基水平.结果 采用1 000 nmol/L地塞米松处理成骨细胞,按照实验分组干预培养24 h,倒置相差显微镜下观察和MTT结果提示,与正常对照组相比,DEX组成骨细胞出现明显的皱缩、变形,细胞存活率显著降低,加入NAC或DPI后细胞形态良好,生长旺盛.荧光探针检测结果显示,DEX组成骨细胞内氧自由基生成(45.14％±1.49％)与正常对照组(5.86％±0.28％)相比,差异有统计学意义(P=0.000);Hoechst染色结果显示,DEX组成骨细胞凋亡(29.60％±1.52％)与正常对照组(4.12％±0.67％)相比,差异有统计学意义(P=0.000).DEX组成骨细胞内氧自由基生成与DEX+NAC组(28.06％±1.61％)和DEX+DPI组(23.70％±1.28％)相比,差异均有统计学意义(均P=0.000),提示NAC或DPI显著降低了成骨细胞内氧自由基的产生.DEX组成骨细胞凋亡与DEX+NAC组(8.94％±1.47％)和DEX+DPI组(12.96％±2.03％)相比,差异均有统计学意义(均P=0.000),提示NAC或DPI显著降低了成骨细胞凋亡.Nox4的荧光定量PCR显示DEX组Nox4的基因表达是正常对照组的2.67倍(t=-10.301,P=0.009),Western Blot检测显示DEX组Nox4的蛋白表达是正常对照组的2.37倍(t=-15.542,P=0.004),差异有统计学意义.进一步通过Nox4 siRNA靶向沉默Nox4的表达,DEX+Nox4 siRNA组成骨细胞内氧自由基的生成(14.53％±1.00％)比DEX组(31.45％±0.72％)降低了16.92％,两者比较差异有统计学意义(P=0.000).结论 Nox4介导的氧自由基生成在高浓度地塞米松诱导成骨细胞凋亡过程中起重要作用,Nox4可能是糖皮质激素性股骨头坏死治疗过程中的重要靶点.
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